Аберрантні патерни метилювання ДНК розглядають
як чутливі та специфічні маркери раннього канцерогенезу, здатні вдосконалити діагностику злоякісних пухлин. Одним із перспективних епігенетичних показників
є гіперметилювання гена рецептора стимулювального
гормону росту (GHSR), яке корелює з інвазивністю
та несприятливим прогнозом низки онкопроцесів.
З огляду на брак даних щодо ролі цього маркера в неопластичних змінах слизової оболонки порожнини рота
актуальним є дослідження частоти та діагностичної цінності метилювання GHSR у різних стадіях пухлинної трансформації орофаціальної ділянки. Мета
дослідження. Оцінити рівень метилювання першого
екзона гена GHSR у зразках тканини раку порожнини
рота, передпухлинних уражень і нормальної слизової
з метою визначення його потенціалу як біомаркера
ранньої діагностики. Методи дослідження. Проаналізовано 79 біоптатів: 35 – раку порожнини рота, 16 – передпухлинних станів, 28 – інтактної слизової.
Геномну ДНК виділяли набором GeneJet Genomic DNA
Purification Kit; бісульфітне перетворення проводили
за допомогою EpiJet Bisulfite Conversion Kit. Ампліфікацію ділянки першого екзона GHSR здійснювали
мультиплексною TouchDown-ПЛР із подальшим кількісним піросеквенуванням на системі PyroMark Q96
MD. Статистичну обробку проводили у STATISTICA
6.1 із використанням t-критерію Стьюдента; різницю вважали достовірною за p < 0,01. Наукова
новизна. У зразках раку порожнини рота зафіксовано
виражене гіперметилювання GHSR (56,6 ± 20,4%),
що суттєво перевищувало показники передпухлинних
уражень (18,6 ± 6,3%; p ≤ 0,04) та нормальної тканини (4,8 ± 1,1 %; p ≤ 0,025). Розраховані діагностичні
характеристики методу продемонстрували 89% специфічність і 99% чутливість щодо виявлення раку
порожнини рота. Отримані дані свідчать, що підвищення рівня метилювання GHSR уже на передраковій
стадії відображає епігенетичний зсув у напрямі неопластичної трансформації. Висновки. Гіперметилювання першого екзона гена GHSR є інформативним
маркером злоякісних і передпухлинних процесів порожнини рота, що може використовуватись у схемах раннього скринінгу та моніторингу прогресії патології.
Інтеграція визначення метильованої ДНК GHSR до
клінічної практики здатна підвищити точність діагностики та сприяти персоналізації терапевтичних
стратегій.
Aberrant DNA-methylation patterns are recognised as
sensitive and specific hallmarks of early carcinogenesis
and hold considerable promise for improving cancer
diagnostics. Hyper-methylation of the growth-hormone
secretagogue receptor gene (GHSR) has been linked
to tumour invasiveness and poor prognosis in several
malignancies, yet its role in oral neoplastic transformation
remains unclear. Purpose of the study. To evaluate
methylation of exon 1 of the GHSR gene in oral squamouscell carcinoma (OSCC), oral premalignant lesions
and normal mucosa, and to assess its diagnostic utility.
Research methods. Seventy-nine biopsy specimens
were analysed: 35 OSCC, 16 premalignant lesions and
28 samples of healthy oral mucosa. Genomic DNA was
purified with the GeneJet Genomic DNA Purification
Kit and bisulphite-converted using the EpiJet Bisulfite
Conversion Kit. The target region of exon 1 of GHSR was
amplified by multiplex TouchDown-PCR and quantified
by pyrosequencing on a PyroMark Q96 MD platform.
Statistical analysis employed Student’s t-test (STATISTICA
6.1) with significance set at p < 0,01. Scientific novelty.
Pronounced hypermethylation of GHSR was detected in
OSCC samples (56,6 ± 20,4%), significantly exceeding
levels in premalignant tissue (18,6 ± 6,3%; p ≤ 0,04)
and normal mucosa (4,8 ± 1,1%; p ≤ 0,025). Diagnostic
performance analysis revealed 99% sensitivity and 89%
specificity for distinguishing OSCC from healthy tissue.
Elevated GHSR methylation in premalignant lesions
indicates an early epigenetic shift towards malignant
transformation. Conclusions. Hypermethylation of exon
1 of GHSR is an informative biomarker for malignant
and premalignant processes in the oral cavity and could
be incorporated into early-screening protocols and
disease-progression monitoring. Implementation of GHSR
methylation assays may enhance diagnostic accuracy and
support personalised therapeutic approaches.
