Peripheral blood lymphocytes phenotypic composition in patients with cervical papilomavirus infections, which IgG antibody to herpes simple viruses were determined

Abstract

The aim of the work – to determine the phenotypic composition of peripheral blood lymphocytes in patients with cervical papillomavirus infection (PVI), whose blood serum showed IgG antibodies to herpes simplex viruses with (HSV)-I and/or (HSV)-2. Materials and methods. 43 women (average age 26.5 years old) with human papillomavirus (HPV)-induced cervical papillomavirus infection diseases diagnosed by molecular-biological, colposcop, and cytological methods of examination were inspected. Serum screening for anti-HSV-1 and anti-HSV-2 IgG as well as examination of anti-HSV-2 IgG avidity index were examined by solid-phase enzymelinked immunosorbent assay. The phenotypic composition of peripheral blood lymphocytes were examined by the flow cytofluorometry method using monoclonal antibodies (Beckman Coulter, USA) to CD3+, CD4+, CD8+, CD3+/HLA-DR+, CD3+/CD16+/€D56+, CD4+45RA+ CD16+/CD56+/CD8+ and CD16+/CD56+ antigens. The count of cells and data analysis were performed by cytofluormeter FC-500 (Beckman Coulter, США). The count of cells and analysis of the results were performed by cytofluormeter i. IgG antibodies to HSV- 1, HSV-2 or to these two viruses in serum of patients with cervical PVI were detected in 90.0 % of cases, in which the clinical symptoms of herpetic infection were no identifcated. IgG antibodies to HSV-2 in serum of patients had only mean or low avidity. In patients with IgG antibodies to HSV-2 or simultaneously with HSV-2 and HSV-1, and, above all, with low- avidity IgG antibodies to HSV-2 the frequency of HPVinduced cervical intraepithelial neoplasia (CIN) of І-ІІ and ІІІ grade and cancer in situ was increased. The number of CD3+, CD4+, CD8+, CD4+45RA+ аnd CD16+/CD56+ cells in the patients’ peripheral blood, as well as the CD4+/CD8+ index were not altered compared to the indicators for clinically healthy subjects (control). But the tendency to increase the number of CD16+/CD56+/CD8+ cells, as well as a signifcant increase in the number of СD3+/HLA-DR+ cells were determined. The number of CD3+/CD16+/CD56+ cells was reduced in peripheral blood of patients with lowavidity of IgG antibodies to HSV-2, whereas in the remaining patients it was at the control level. meter FC-500 (Beckman Coulter, USA).Results and discussion. In patients serum with CU HPVI without clinical signs of herpetic infection to HSV-1, HSV-2 IgG antibodies, both these two viruses simultaneously were diagnosed in 90.0 % of cases. Anti-HSV-2 IgG in patients’ serum had only medium or low avidity. The frequency of revealing HPV-induced cervical intraepithelial neoplasia (CIN) I-ІІ and ІІІ degree of activity, and cancer in situ increased in patients with anti-HSV-2 IgG or simultaneously to anti-HSV-1 and anti-HSV-2 but, frst of all, in patients with low avidity anti-HSV-2 IgG. The number of CD3+, CD4+, CD8+, CD4+45RA+ and CD16+/CD56+ cells in the patients’ peripheral blood, as well as CD4+/CD8+ index did not change as compared with group of clinically healthy persons (control group). However, there was determined the tendency of CD16+/CD56+/CD8+ cells number increase and signifcant СD3+/HLA-DR+ cells number increase. CD3+/CD16+/CD56+ cells number in peripheral patients’ blood with low avidity to anti-HSV-2 IgG antibodies was reduced whereas it was equal to control level in the rest patients. Conclusion. In patients with CU HPVI without clinical manifestation of herpetic infection anti-HSV-2 low avidity IgG were identifed. The frequency of more severe CIN cause was increased. There were more significant displacement of cell immunity confrmed by CD3+/HLA-DR+ cells number increase and tendency of CD16+/56+CD8+ cells number increase, too, on the background of СD3+/CD16+/ CD56+ cytotoxic T-lymphocytes decrease. Complex individual treatment of these patients with anti-herpetic drugs must probably be used.

Мета роботи – визначення фенотипового складу лімфоцитів периферичної крові у хворих на папіломавірусну інфекцію (ПВІ) шийки матки (ШМ), у сироватці крові яких виявляли IgG антитіла до вірусів простого герпесу (ВПГ)-1 та/або ВПГ-2. Матеріали і методи. Обстежено 43 жінки (середній вік 26,5 років) із індукованими папіломавірусами людини (ВПЛ) захворюваннями ШМ, діагностованими за допомогою молекулярно-біологічного, кольпоскопічного та цитологічного методів дослідження. Скринінг сироваток на наявність IgG антитіл до ВПГ-1 та ВПГ-2, а також визначення індексу авідності IgG антитіл до ВПГ-2 проводили за допомогою твердофазного імуноензимного аналізу. Фенотиповий склад лімфоцитів периферичної крові визначали за допомогою методу проточної лазерної цитофлуорометрії з використанням моноклональних антитіл (Beckman Coulter, США) доантигенів CD3+, CD4+, CD8+, СD3+/HLA-DR+, СD3+/ CD16+/CD56+, CD4+45R+, CD16+/CD56+/CD8+ та CD16+/CD56+. Підрахунок клітин та аналіз результатів проводили на цитофлюориметрі FC-500 (Beckman Coulter, США). Результати досліджень та їх обговорення. У сироватці крові хворих на ПВІ ШМ, в яких не було клінічних симптомів герпетичної інфекції, виявлено IgG антитіла до ВПГ-1, ВПГ-2 або до цих двох вірусів у 90,0 % випадків. IgG до ВПГ-2 у сироватці крові хворих мали лише середню або низьку авідність. Частота виявлення ВПЛ-індукованих цервікальних інтраепітеліальних неоплазій (ЦІН) І-ІІ та ІІІ ступенів і cancer in situ зростала у хворих, в яких були IgG антитіла до ВПГ-2 або одночасно до ВПГ- 2 та ВПГ-1, і, насамперед у хворих із низькоавідними IgG до ВПГ-2. У периферичній крові хворих не змінювалась кількість CD3+, CD4+, CD8+, CD4+45RA+ та CD16+/CD56+ клітин, а також індекс CD4+/CD8+ порівняно з показниками для клінічно здорових осіб (контроль). Однак встановлено тенденцію до підвищення кількості CD16+/CD56+/CD8+ клітин, а також суттєве підвищення кількості СD3+/HLA-DR+ клітин. Кількість CD3+/CD16+/CD56+ клітин зменшувалась у периферичній крові хворих із низькоавідними IgG до ВПГ-2, тоді як у решти хворих зберігалась на рівні контролю. Висновки. У хворих на ПВІ ШМ, в яких за відсутності клінічної маніфестації герпетичної інфекції ідентифікували низькоавідні IgG антитіла до ВПГ- 2, зростала частота виявлення ЦІН тяжчого ступеня та відбувався суттєвіший зсув показників клітинної ланки імунітету, підтверджений підвищенням кількості CD3+/HLA-DR+клітин, тенденцією до зростання кількості CD16+/56+CD8+ клітин на тлі зменшення вмісту цитотоксичних СD3+/CD16+/ CD56+ Т-лімфоцитів. Імовірно, комплексне персоніфіковане лікування цих хворих доцільно проводити з використанням протигерпетичних препаратів.