Експериментальна оцінка лейкоцитарної формули крові щурів на тлі моделювання імунодефіциту, дисбіозу та лікувально-профілактичних заходів

Abstract

Поєднаний імунодефіцит та дисбіоз, як це спостерігається при хіміо- та антибіотикотерапії, мають синергійний негативний вплив на імунну систему. Перспективним напрямом є розробка підходів для корекції цих порушень. Мета дослідження. Визначити вплив комплексного лікувально-профілактичного комплексу на лейкоцитарну формулу периферичної крові щурів за умов експериментально індукованого циклофосфамідом імунодефіциту та лінкоміцин-обумовленого дисбіозу. Матеріали та методи. ослідження проведено на 30 статевозрілих щурах-самцях лінії Wistar масою 280±10 г. Тварин поділено на три групи (n=10): інтактну (контроль), групу з поєднаною патологією (імунодефіцит + дисбіоз) та групу поєднаної патології, що протягом 30 діб отримувала лікувальнопрофілактичний комплекс (ЛПК). По завершенні експерименту здійснювали забір крові з хвостової вени, готували мазки та визначали диференційований склад лейкоцитів (нейтрофіли паличкоядерні й сегментоядерні, лімфоцити, моноцити, еозинофіли) у мазках крові (на 100 лейкоцитів), після фарбування за Романовським–Гімзою. Імунний статус оцінювали за лімфоцитарним індексом (відношення % лімфоцитів до сегментоядерних нейтрофілів). Статистичну обробку даних проводили у програмі STATISTICA 6.1, міжгрупові відмінності оцінювали за t-критерієм Стьюдента (вважали вірогідними при p<0,01). Результати дослідження. У групі щурів з поєднаною патологією виявлено істотні зміни лейкоцитарної формули у порівнянні з контролем. Зокрема, розвинулася виражена лімфопенія та моноцитопенія, одночасно зі зростанням кількості нейтрофілів – паличкоядерних у 3,9 рази, сегментоядерних у 1,33 рази, а також еозинофілів у 2,6 рази. Індекс лімфоцити/нейтрофіли знизився майже вдвічі порівняно з інтактними тваринами, що підтверджує розвиток імуносупресії. Застосування ЛПК на тлі імунодефіциту та дисбіозу сприяло суттєвій позитивній динаміці показників формули крові. Через 30 діб лікування відсоток лімфоцитів зріс у 1,39 рази, а моноцитів – у 2,1 рази; вміст паличкоядерних нейтрофілів зменшився в 2,7 рази, еозинофілів – в 2,1 рази порівняно з патологічною групою. Лейкоцитарні показники тварин, що отримували комплекс, наблизилися до рівня інтактного контролю, а лімфоцитарний індекс зріс більш ніж на 90%, що свідчить про відновлення імунного статусу. Висновки. Отримані результати підтверджують доцільність комплексного підходу, спрямованого на одночасну корекцію порушень імунітету та мікробіоценозу. Перспективними є подальші доклінічні і клінічні дослідження розробленого ЛПК з метою його впровадження у медичну практику.

Combined immunodeficiency and dysbiosis as commonly encountered during chemo- and antibiotic therapy exert a synergistically deleterious impact on the immune system. Consequently, developing strategies to correct these disturbances is a promising research direction. The purpose of the study was to determine the effect of a comprehensive therapeutic-prophylactic complex (TPC) on the peripheral blood leukocyte profile of rats under experimentally induced cyclophosphamide immunodeficiency and lincomycin-driven dysbiosis. Materials and methods. The study was carried out on 30 mature male Wistar rats (body mass 280 ± 10 g). Animals were randomized into three groups (n = 10 each): an intact control, a combined-pathology group (immunodeficiency + dysbiosis), and a combined-pathology group treated for 30 days with the TPC. At the end of the experiment, blood was collected from the tail vein. Blood smears were prepared and stained with the Romanowsky–Giemsa method, after which 100 leukocytes were differentiated (band and segmented neutrophils, lymphocytes, monocytes, eosinophils). Immune status was assessed using the lymphocytic index (percentage of lymphocytes to segmented neutrophils). Statistical analysis was performed with STATISTICA 6.1; inter-group differences were evaluated by Student’s t-test and regarded as significant at p < 0.01. Research results. Rats with the combined pathology showed pronounced alterations in leukocyte distribution compared with controls: marked lymphopenia and monocytopenia accompanied by a 3.9-fold rise in band neutrophils, a 1.33-fold rise in segmented neutrophils, and a 2.6-fold rise in eosinophils. The lymphocyte/neutrophil index decreased by nearly 50 %, indicating severe immunosuppression. Administration of the TPC produced a substantial corrective effect: after 30 days, the proportion of lymphocytes increased 1.39-fold and monocytes 2.1- fold, whereas band neutrophils and eosinophils decreased 2.7-fold and 2.1-fold, respectively, relative to the untreated pathology group. Leukocyte parameters in treated animals approximated those of intact controls, and the lymphocytic index rose by more than 90 %, signifying restoration of immune competence. Conclusions. The findings support the rationale for an integrated approach aimed at simultaneous correction of immune and microbiota disturbances. Further pre-clinical and clinical investigations of the developed TPC are warranted to facilitate its translation into medical practice.